RT-qPCR ve RT-Dijital PCR Yöntemlerinin Kronik Myeloid Lösemi’de BCR-ABL1 Transkriptlerini Tespit Etme ve Ölçümleme Başarılarının Karşılaştırılması
PDF
Atıf
Paylaş
Talep
Özgün Araştırma
CİLT: 30 SAYI: 4
P: 421 - 424
Ekim 2019

RT-qPCR ve RT-Dijital PCR Yöntemlerinin Kronik Myeloid Lösemi’de BCR-ABL1 Transkriptlerini Tespit Etme ve Ölçümleme Başarılarının Karşılaştırılması

Gazi Med J 2019;30(4):421-424
1. University of Health Sciences, Dr. Abdurrahman Yurtaslan Ankara Oncology Training and Research Hospital, Department of Medical Genetics, Ankara, Turkey
Bilgi mevcut değil.
Bilgi mevcut değil
Alındığı Tarih: 07.11.2019
Kabul Tarihi: 19.11.2019
PDF
Atıf
Paylaş
Talep

ÖZET

Sonuç:

KML hastalarındaki BCR-ABL1 transkript düzeyinin ölçümünde, RTdijital PCR yöntemi RT-qPCR yöntemine göre anlamlı düzeyde daha hassas bulunmuştur, fakat bu üstünlük tüm örneklerde RT-dijital PCR lehine değildir. Bu sebeple, RT-dijital PCR yönteminin etkinliğinin daha iyi anlaşılabilmesi için daha ileri çalışmalara ihtiyaç vardır.

Bulgular:

Farklı yöntemlerden elde edilen BCR-ABL1/ABL oranları kıyaslandığında iki yöntem arasında anlamlı düzeyde farklılık tespit edildi (p=0.017) (Tablo 1).

Yöntem:

Toplamda 39 KML hastası çalışmaya alındı. RNA izolasyon kiti (QIAamp RNA Blood Mini Kit) ile total RNA izole edildi.RT-qPCR yöntemi için Qiagene Rotor-Gene-Q sistemi,RT-dijital PCR yöntemi içinQX200™ Droplet Digital™ PCR (ddPCR™) sistemi kullanıldı.

Amaç:

Kronik myeloid lösemi (KML), myeloproliferatifneoplaziler içerisinde sınıflanmış bir hematolojik malignitedir. t(9;22)(q34;q11) translokasyonu ile oluşan Philadelphia kromozomu ile BCR/ABL1 füzyon geni oluşur. Philadelphia kromozomu, neredeyse bütün KML vakalarında tespit edilmektedir. RT-qPCR yöntemi, BCR/ABL1 füzyon geninin kantitatif ölçümünde rutinde en sık kullanılan yöntemdir. RT-dijital PCR yöntemi, alternatif bir yöntem olarak değerlendirilebilir fakat, bu konuda şimdiye kadar literatürde yapılmış yeterli düzeyde çalışma yoktur. Bu çalışmada, RT-qPCR ve RT-dijital PCR yöntemlerinin BCR-ABL1 transkriptlerini tespit etme ve ölçümleme başarılarının kıyaslaması planlandı.

Anahtar Kelimeler:
Kronik myeloid lösemi, BCR-ABL1, RT-qPCR, RT-digital PCR